熒光濾光片
簡(jiǎn)要描述：熒光濾光片一般采用單片無(wú)色透明的玻璃作為基底，在玻璃的兩個(gè)表面鍍膜。增反膜的厚度會(huì)選擇為半波長(zhǎng)的整數(shù)倍，此時(shí)反射疊加增強(qiáng)；增透膜的厚度為1/4波長(zhǎng)的倍數(shù)，此時(shí)投射疊加增強(qiáng)。
詳細(xì)介紹
熒光濾光片的特征：
1. 和燃料的激發(fā)峰、發(fā)射峰匹配，且交疊小
2. 截止深度深
3. 自發(fā)熒光小
4. 透鏡面形好，利于熒光成像的提取。如果透鏡表面的平整度不好，則會(huì)產(chǎn)生波前扭矩或楔角，波前扭矩會(huì)改變聚焦或成像位置，一般透射波前扭矩（TWD）比反射波前扭矩（RWD）對(duì)成像的影響更加直接，也會(huì)有更嚴(yán)格的要求。
原理：
一般采用單片無(wú)色透明的玻璃作為基底，在玻璃的兩個(gè)表面鍍膜。增反膜的厚度會(huì)選擇為半波長(zhǎng)的整數(shù)倍，此時(shí)反射疊加增強(qiáng)；增透膜的厚度為1/4波長(zhǎng)的倍數(shù)，此時(shí)投射疊加增強(qiáng)。
熒光濾光片的激發(fā)和成像方式大體可分為如下三種：
聚焦型：入射激發(fā)光聚焦在待測(cè)樣品上；
寬場(chǎng)型：入射激發(fā)光束以較大的面積打到樣品上
全內(nèi)反射型（TIRF）：激發(fā)光透過(guò)樣品，觀測(cè)倏逝波成像
包含激發(fā)濾光片，發(fā)射濾光片和分色鏡，專為熒光成像應(yīng)用而設(shè)計(jì)，提供長(zhǎng)波通、單帶通、雙帶通和三帶通的熒光濾光片供您選擇。分子在吸收帶吸收激發(fā)光譜，然后在發(fā)射帶發(fā)射長(zhǎng)波的輻射光譜，即形成了熒光光譜，這就是工作原理。在分析領(lǐng)域，熒光可用于對(duì)生物和化學(xué)活性進(jìn)行定性判別、定量分析和實(shí)時(shí)觀察。由于靈敏度高、特異性好、簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物和分析等領(lǐng)域。
熒光濾波片選取的原則是在成像端盡可能讓熒光/發(fā)射光透過(guò)，同時(shí)*阻擋激發(fā)光，獲得高的信噪比。尤其是對(duì)于多光子激發(fā)和全內(nèi)反射顯微鏡的應(yīng)用，微弱的噪聲也會(huì)對(duì)成像效果造成很大的干擾，因此對(duì)信噪比的要求更高。
常我們看濾光片的參數(shù)一般會(huì)看透射率光譜，但往往熒光相對(duì)于激發(fā)光的強(qiáng)度很弱，選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖——OD值。OD值更能直觀地反映濾光片對(duì)光的阻擋特性。
在選擇激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片時(shí)，兩者的阻擋深度光譜交點(diǎn)（OD交點(diǎn)）是重要的判斷標(biāo)準(zhǔn)，一般要求寬場(chǎng)光源激發(fā)是交點(diǎn)OD值大于5，激光激發(fā)時(shí)大于OD6，以實(shí)現(xiàn)較好的熒光信噪比。
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